Le contrôle bactérien rapide des eaux par epifluorescence

Rapid bacterial monitoring of water by epifluorescence

Service des Eaux - Institut Pasteur de Lille BP 245 - 59019 Lille Cedex

Résumé

La mise au point de membranes filtrantes planes, non fibreuses, a permis le développement du dénombrement microscopique direct par épifluorescence, des bactéries totales, viables et non viables, dans les eaux. Les cellules retenues sur le filtre sont colorées avec un fluorochrome spécifique des acides nucléiques, ce qui réduit l'interférence des particules minérales. Les résultats, obtenus en 1/2 h, sont comparables à ceux de la microscopie électronique ou d'autres techniques lourdes, «de référence».

Ces dénombrements intéressent l'étude des eaux naturelles oligotrophes, particulièrement des eaux minérales et des eaux marines profondes dans lesquelles les formes cultivables sont en proportion infime. Ils concernent également des eaux ultrapures, «stériles», injectables, pour hémodialyse, etc... Nés de l'amélioration des membranes filtrantes, ils sont en retour irremplaçables pour contrôler l'efficacité de la filtration des liquides dans l'industrie. Ils sont également utiles aux contrôles d'eaux de boisson et de baignade, spécialement là où les conditions hostiles font craindre pour la viabilité des populations microbiennes (eaux de mer, eaux désinfectées).

Abstract

The perfecting of plane, non-fibrous filter membranes has enabled the development of direct microscopic counting by epifluorescence of ail viable and non-viable bacteria in water. The cells remaining on the filter are dyed with a fluorochrome specific to nucleic acids, thus reducing interference by mineral particles. Results are obtained in half an hour and are comparable to those obtained using electronic microscopy or other cumbersome «reference» techniques.

These counts concern natural oligotrophic water, especially mineral waters and deep sea water which countain extremely small quantifies of cultivable forms. The technique can also be used for monitoring ultra-pure, «sterile» and injectable waters haemodialysis fluids, etc. It developed from the improvement of filter membranes and is, in return, irreplaceable for checking the effectiveness of the filtration of liquids in industry. It can also be used for monitoring potable or bathing water, particularly where hostile conditions give rise to fears for viability of microbial populations (sea water, disinfected water).